By tincion de gram gy mluisamolianr Ocopa» 14, 2016 | 5 pagos Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua UNAN – Managua Instituto Politécnico de la Salud Dr. Luis Felipe Moncada I. P. S Tema: Tinción de Gram Benjamín Docente: Lic. Carrera: Lic. Microbio Elaborado por: ors to View nut*ge justa Francisca Berm ez er Oscarlett Inm ernos Managua, miércoles 1 5 de mayo 2013 Objetivos Dar a conocer el fundamento de la tinción de Gram. rosa. Fundamento: Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negatlvas.
La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglicano (también conocido como mureína) Por el contrario, la capa de peptidoglicano de las Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas.
Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y Lipopolisacáridos. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente de Iferencias constitutivas de 21_1fS su pared. tanto este complejo se escapa, perdiéndose la coloracion azul violácea.
Pero por el contrario, las Gram positivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporción de peptidoglicano, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sino que este actúa deshidratando los poros errándolos, lo que impide que pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea. Preparación del frotis 1. Marcar el portaobjeto con el número del paciente. 2. Colocar una gota de solución salina estéril. 3. on un aplicador de madera tomar una colonia del microorganismo en estudio y suspenderlo en la gota de solución salina colocada en la lámina. *Los frotls delgados son los mejores resultados. 4. Dejar secar la preparación a temperatura ambiente. 5. Fijarla al calor, pasándola ligeramente por la llama del mechero. Una buena indicación del grado de calentamiento, es que al tocar el reverso de la lámina con su mano no debe quemarse. 6. Colocar la lámina en el puente de tinción. Técnica de tincion 1 .
Ubicar las láminas extendidas y fijadas en una bandeja adecuada y cubrir su superficie con cristal violeta por un minuto. Lavar con agua del grifo y escurrir. 2. Cubrir la superficie de la lámina con la solución de lugol o yodo de Gram por un minuto. Lavar con agua del grifo y escurrir. 31_1fS Observar la lámina al microscopio. Colorantes Cristal violeta :Sirve como colorante basico, las celulas se tiñen on dicho colorente de morado. Actua en las bacterias uniendose a la pared celular bacteriana , con ayuda del mordiente (lugol) que refuerza la union del colorante.
Las bacterias Gram positiva debido a la estructura y composion de su pared celular retienen el complejo cristal voleta-lugol. Mordiente lugol (yodo): Se adiciona yoduro que reacciona con el cristal violeta y fama un complejo denominado cristal violeta- yoduro, en este punto todas las celulas continuan de color morado Alcohol (descolorante) : Se añade un solvente no polar, el cual actua lavando el complejo cristal violeta-yoduro de las celulas Gram negativas. El alcohol disuelve el contenido lipidico de la pared celular.
Safnnina vuelve a teñir con este colorante de manera que las bacterias Gram negativa que se habian decolorado , se tiñan de rosado mientras que la bacterias gram positivas no se afectan con la contratincion y permanecen moradas. Bacterias según su estructura: Bacilos: formas de barras, Bacillus anthracis V Clostri mplo E. coli, Salmonella, 406 S cholerae, V. parahemoliticus, V. fulnicus. Cocobacilos: se encuentran bacterias tales como, Haemophylus influenzae, Chlamydia trachomatis y Bordetella. Diplococos: se encuentran bacterias tales como, Neisseria onorrhoeae, Moraxella catarrhalis y Neisseria meningitidis.
Bacterias según su requerimiento de oxígeno: Anaerobias estrictas: se pueden encontrar bacterias como, Campylobacter gracilis, Clostridium perfrigens y Bacteroides fragilis. Anaerobias facultativas: se pueden encontrar bacterias como, Clostridium tetani, Mycobacterium tuberculosis y treponema pallidum. Conclusión La tinción de Gram es una técnica diferencial comúnmente empleada en el diagnostico microbiológico, fue descubierta por Hans Christian Gram en 18 para poder referirse SI_IFS a la morfología celular bact para poder realizar
